خرمای تازه از یک بازار طریقه مصرف پودر هسته خرما محلی در شهر البهاء عربستان سعودی خریداری شد و دانه ها استخراج شد، چندین بار با آب تمیز شسته شد و در دمای اتاق به مدت 7 روز در هوا خشک شد.
پس از آن به مدت 2 ساعت در دمای 370 کلوین در فر خشک شد تا اطمینان حاصل شود که هسته ها کاملاً خشک می شوند.
در مرحله بعد، AB-DPK خشک شده در فر برای تشکیل پودر خرد شده و همانطور که در زیر توضیح داده شده است استفاده می شود.
رده سلولی سرطان کولورکتال انسانی (HCT-116) و رده سلولی سرطان کبد (HepG2) مورد استفاده در این مطالعه از آزمایشگاه دکتر نعمت الله، دانشکده داروسازی، KAU به دست آمد.
در این مطالعه از سلول های سرطانی HCT-116 و HepG2 برای ارزیابی خواص ضد سرطانی AB-DPK استفاده شد.
سلول‌ها در محیط معجون سیر و لیمو Eagles اصلاح‌شده Dulbecco (DMEM) همراه با 10% (v/v) سرم جنین گاوی (FBS)، 100 واحد در میلی‌لیتر پنی‌سیلین/استرپتومایسین و 1% (v/v) L-گلوتامین در دمای 37 درجه سانتیگراد کشت داده شدند.
در انکوباتور CO2 5% مرطوب شده.
برای ارزیابی اثر گذاشتن چوب دارچین در کیف پول سیتوتوکسیک ترکیب عصاره AB-DPK بر روی رده سلولی HCT-116، یک سنجش زنده ماندن سلولی MTT با کشت سلول ها در یک صفحه 96 چاهی با تراکم (105×1 سلول در چاه) انجام شد.
پس از 24 ساعت انکوباسیون، سلول ها در سه تکرار با ترکیبات در 6 رقت سریال (250-3.9 میکروگرم بر میلی لیتر) به مدت 72 ساعت تحت درمان قرار گرفتند.
چاه های کنترل مناسب حاوی سلول های بدون مواجهه نیز گنجانیده شدند. سپس محیط برداشته شد و با محلول MTT (2 میلی گرم در میلی لیتر) جایگزین شد.
صفحات با فویل برای مسمومیت با وایتکس چه بخوریم آلومینیومی پوشانده شده و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 4 ساعت انکوبه شدند.
پودر DPK با افزودن 200 میکرولیتر 100٪ DMSO (که از 0.5٪ غلظت کل تجاوز نمی کند) حل شد.
سپس صفحات به مدت 5 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد در انکوباتور CO2 5% انکوبه شدند و سیگنال های رنگ سنجی در طول موج 570 نانومتر با صفحه خوان SpectraMax M3 اندازه گیری شد.
- منابع:
- تبلیغات:
دیدگاه شما با موفقیت ثبت شد.